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大腸桿菌顯色培養(yǎng)基作用是什么?具體操作的步驟

更新時(shí)間:2018-11-23  |  點(diǎn)擊率:1414
   大腸桿菌顯色培養(yǎng)基作用是什么?具體操作的步驟
  
  大腸桿菌顯色培養(yǎng)基原理
  
  M1295I配方根據(jù)ISO166492:1999設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)
  
  X-葡萄糖醛酸檢測(cè)?-葡萄糖醛酸酶
  
  大腸桿菌——藍(lán)綠色
  
  其他-無色
  
  大腸桿菌顯色培養(yǎng)基操作步驟
  
  1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;
  
  2、取樣品液1ml加入冷卻至45-50℃顯色培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上;
  
  3、36℃培養(yǎng)18~24h,選用有30~200個(gè)菌落的平板,計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。
  
  總大腸桿菌=藍(lán)綠色菌落;
  
  4、對(duì)可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上,36℃培養(yǎng)12-16小時(shí),挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(yàn)(本公司有生化鑒定管套裝4種x4套)。
  
  大腸桿菌顯色培養(yǎng)基使用方法:
  
  1.稱取本品干粉41.6g,用1000mL蒸餾水或純水溶解,可按比例擴(kuò)增或縮小。
  
  2.混合均勻加熱至100℃,并不斷攪拌直至*溶解,無需滅菌。
  
  3.采用傾注法:將培養(yǎng)基水浴冷卻至約50℃,準(zhǔn)備直徑90mm已滅菌平皿,每個(gè)培養(yǎng)皿接種1ml樣品,然后傾注約15ml上述溶解的培養(yǎng)基,混勻使其凝固,倒置,37℃培養(yǎng)24小時(shí)。
  
  4.采用表面接種法:冷卻至約50℃,搖勻?qū)⑴囵B(yǎng)基傾注于已滅菌平皿中。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天(避光,4℃)。樣品用劃線接種法或?yàn)V膜法,37℃培養(yǎng)24小時(shí)。
  
  大腸桿菌顯色培養(yǎng)基注意事項(xiàng):
  
  1.稱量時(shí)注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。
  
  2.干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊。
  
  3.自制平板時(shí)需注意培養(yǎng)基的厚度,厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降,開裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養(yǎng)基,平板培養(yǎng)基厚度至少為2mm。
  
  
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