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不動桿菌顯色培養(yǎng)基的應(yīng)用

更新時間:2019-07-26  |  點擊率:1475

鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumannii),屬于革蘭氏陰性菌,是一種嚴(yán)格需氧、非乳糖發(fā)酵的條件致病菌,移動性不高,但生命力*,可廣泛地存在于大自然中。

 

該菌是不動桿菌屬細(xì)菌中在醫(yī)院感染中常見的一種,也是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)動物的病原菌。它通常會引起菌血癥,肺炎,腦膜炎,腹膜炎,心內(nèi)膜炎,以及泌尿道和皮膚感染。鮑曼不動桿菌已經(jīng)成為醫(yī)院感染的主要來源,尤其是重癥監(jiān)護室。

 

近些年來,鮑曼不動桿菌被人們發(fā)現(xiàn)對許多常用的抗生素都耐藥,包括β內(nèi)酰胺類和氨基糖甙類。其中,需要機械通氣的免疫力下降患者具有感染不動桿菌的高風(fēng)險。

 

而鮑曼不動桿菌的傳統(tǒng)檢測方法相較困難,一方面由于大量抗生素及化療約物的應(yīng)用,導(dǎo)致細(xì)菌生物學(xué)特性發(fā)生變化,影響細(xì)菌細(xì)胞壁的合成及細(xì)胞膜的通透性,且由于該菌初次分離時伴有其他雜菌生長,雖然鑒定所用為單個菌落,但多種細(xì)菌共存于一個平板,各菌在生長代謝過程中可能會產(chǎn)生一些物質(zhì),干擾鮑曼不動桿菌的正常生長。

 

另一方面?zhèn)鹘y(tǒng)鮑曼不動桿菌的檢測鑒定操作要求嚴(yán)格,存菌液的濃度、均勻度、溫度及細(xì)菌的純度等多方面都有其特定的要求。鮑曼桿菌的生化反應(yīng)較弱,大多生化反應(yīng)均為陰性,若實際操作過程中在某一方面不夠重視,或某一生化反應(yīng)的差異導(dǎo)致細(xì)菌鑒定結(jié)果的不同,都可能導(dǎo)致鑒定結(jié)果的差異。

 

因此,能夠而快速的檢測多重耐藥的不動桿菌尤為重要。不動桿菌顯色培養(yǎng)基(貨號:M1938,Hicrome Acinetobacter Agar Base)【需要其中一種添加劑:MDR 選擇性添加劑(貨號:FD271)/利茲不動桿菌選擇性添加劑(貨號:FD335)】適用于檢測從環(huán)境和臨床樣本中選擇性分離多重耐藥不動桿菌,35-37°C培育24-48小時即出結(jié)果(如下圖,多重耐藥不動桿菌菌落顯紫色)。

該顯色培養(yǎng)基中的復(fù)合顯色劑針對的是不動桿菌的特異性酶,因此特異性高,優(yōu)于傳統(tǒng)的以生化代謝反應(yīng)為分離基礎(chǔ)的利茲不動桿菌瓊脂(Leeds Acinetobacter Agar Base,HiMedia貨號M1839)。

 

培養(yǎng)基所需的添加劑如FD271為氨芐青霉素鈉鹽和頭孢他啶,可選擇性分離耐藥型不動桿菌。該培養(yǎng)基中的特別蛋白胨提供氮源、碳源化合物、氨基酸、維生素和其他必要的生長因子。氯化鈉維持滲透壓平衡。選擇因子抑制革蘭氏陽性菌。

 

非耐藥型不動桿菌不會在該培養(yǎng)基上生長,而耐藥型不動桿菌如鮑曼不動桿菌ATCC BAA-1605(對頭孢他啶、慶大霉素、替卡西林、哌拉西林、氨曲南、頭孢吡肟、環(huán)丙沙星、亞胺培南和美羅培南有抗藥性,對阿米卡星和妥布霉素敏感)則可旺盛生長,其回收率大于50%。該不動桿菌顯色培養(yǎng)基特別適合用于不動桿菌的耐藥研究。

 

對不動桿菌具體菌種的確證性鑒定可使用HiMedia公司生產(chǎn)的不動桿菌鑒定試劑盒(貨號:KB014,HiAcinetobacter™ Identification Kit)(下圖),操作方便,節(jié)省時間。

不動桿菌鑒定試劑盒包含的鑒定條含24種生化鑒定反應(yīng):

A部分:

第1孔:吲哚試驗

第2孔:伏普試驗

第3孔:檸檬酸鹽試驗

第4孔:賴氨酸試驗

第5孔:鳥氨酸試驗

第6孔:精氨酸試驗

第7孔:硝酸鹽還原試驗

第8孔:丙二酸試驗

第9孔:尿素酶試驗

第10孔:苯丙氨酸脫氨試驗

第11孔:H2S產(chǎn)生試驗

第12孔:ONPG試驗

B部分:

第1孔至第12孔:糖發(fā)酵試驗

每孔接種50l菌液,35 – 37°C孵育,18-24h后即可觀察結(jié)果。生化反應(yīng)的結(jié)果依據(jù)每孔顏色與試劑盒中的結(jié)果詮釋表對照,以判定陰性陽性,再通過菌種標(biāo)準(zhǔn)表鑒定不動桿菌菌種。

 

HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,一直致力于微生物培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn),其顯色培養(yǎng)基有80多種,涵蓋各個領(lǐng)域,包括無動物源成分及化學(xué)限定的,并具有WHO-GMP認(rèn)證、ISO9001,ISO13485認(rèn)證,CE和FDA注冊登記。其產(chǎn)品行銷140多個國家。

 

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測領(lǐng)域,一如既往地為您帶來的服務(wù)。

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