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特殊細(xì)胞試驗(yàn)對培養(yǎng)基的要求

更新時(shí)間:2020-09-27  |  點(diǎn)擊率:757

放射性同位素32P常用于細(xì)胞信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。由于磷酸化是常見的蛋白修飾和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)形式,因此,32P標(biāo)記的磷酸鹽可摻入到被磷酸化修飾的蛋白中而被檢測到,從而反映出磷酸化蛋白的濃度。在這一過程中,具體位點(diǎn)的磷酸化以及上游的作用信號都是待驗(yàn)證的因素。在該研究中,模型細(xì)胞、帶有突變位點(diǎn)的轉(zhuǎn)染質(zhì)粒、捕獲蛋白和磷酸化蛋白的標(biāo)簽抗體,以及放射自顯影、電泳和蛋白免疫印跡是一連串的研究工具和方法。終顯示為在這個(gè)位點(diǎn)上的磷酸化激活的確證(如下圖)。

該實(shí)驗(yàn)避免了使用抗磷酸化的抗體,避免了因抗體的親和力不強(qiáng)導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)失敗。而放射性同位素又具有很高的靈敏度,因此盡管具有放射性,在許多領(lǐng)域仍有應(yīng)用。

 

在這類實(shí)驗(yàn)中,由于要向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入32P標(biāo)記的磷酸鹽,以摻入到細(xì)胞中,因此培養(yǎng)基中需要祛除固有的磷酸鹽,同時(shí)又保留細(xì)胞所需的其他營養(yǎng)(如生長因子、細(xì)胞外基質(zhì)等)。由于胎牛血清含有各類小分子,因此過濾掉小分子的透析胎牛血清常用于該類實(shí)驗(yàn)中的細(xì)胞培養(yǎng)。

 

北京締一生物公司代理的Ausbian®透析胎牛血清選自澳洲低毒素批次的特級胎牛血清,經(jīng)半透膜透析而成,祛除了10Kda以下包括磷酸鹽在內(nèi)的小分子,因而可更好地用于同位素?fù)饺朐囼?yàn)。

 

Ausbian®透析胎牛血清有100ml/瓶和500ml/瓶不同規(guī)格,每個(gè)批次提供完整的檢測報(bào)告。全程冷鏈運(yùn)輸,不出現(xiàn)凍融現(xiàn)象,保證質(zhì)量不受影響。

 

 

Ausbian®透析胎牛血清出廠前的質(zhì)檢包括:

 

1)理化檢查(如pH值、血紅蛋白、總蛋白、白蛋白、球蛋白、IgG和內(nèi)毒素)

 

2)無菌檢查,包括細(xì)菌、真菌、支原體檢查

 

3)病毒檢查,包括牛藍(lán)舌病毒、牛病毒性腹瀉病毒等十二項(xiàng)指標(biāo)

 

4)生化檢查,包括葡萄糖、甘油三酯和膽固醇

 

5)促細(xì)胞生長試驗(yàn)

 

6)BVD1型和2型抗體檢查

 

總之,對于上述提到的一些特殊的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),應(yīng)選用質(zhì)量合格的透析胎牛血清來培養(yǎng)細(xì)胞,不干擾同位素?fù)饺朐囼?yàn),又能保證細(xì)胞的培養(yǎng)效果。

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