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如何融化胎牛血清讓實(shí)驗(yàn)更好的完成

更新時(shí)間:2020-10-28  |  點(diǎn)擊率:897

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用*的添加培養(yǎng)基。它營(yíng)養(yǎng)豐富,大約含有三四百種不同成分,具有基礎(chǔ)培養(yǎng)基所不具備的營(yíng)養(yǎng)因子。本文締一生物為您分析如何融化胎牛血清讓實(shí)驗(yàn)更好的完成。

 

做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常會(huì)對(duì)血清凍融,怎么才能有效正確的利用血清也有對(duì)應(yīng)的方法,今天分析如何融化血清讓實(shí)驗(yàn)更好的完成。

 

4℃過(guò)夜法相比,三步法為什么對(duì)血清更好呢?重點(diǎn)有二!

 

其一:關(guān)系到沉淀出現(xiàn)的幾率!

 

記得嗎?血清在融化過(guò)程中,瓶子里冰塊的底部你會(huì)看見(jiàn)亮亮的蛋白絲在下沉,如同蜂蜜溶于水時(shí)的亮線(xiàn),這就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔點(diǎn)高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下高級(jí)冰淇淋和大棒冰的區(qū)別,你懂得?。┰囅耄绻捎?/span>4℃過(guò)夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大約需要10小時(shí)左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此時(shí)就很容易有一些蛋白飽和析出,(大多是脂蛋白和纖連蛋白),這就是血清融化中產(chǎn)生沉淀的重要原因之一。

 

采用三步法,只要2.5個(gè)小時(shí),溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過(guò)程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時(shí)間,而且大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。

 

血清融化過(guò)程中,蛋白質(zhì)會(huì)比水先融化。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白

 

其二:血清在培養(yǎng)細(xì)胞中,重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過(guò)程中大限度地保留因子的活性,就變得非常重要?;貞浺幌?,細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),要保持細(xì)胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個(gè)半小時(shí),4℃過(guò)夜需要大約10個(gè)小時(shí)(冰箱一般設(shè)2-8℃,所以各實(shí)驗(yàn)室融化時(shí)間會(huì)稍有出入)。哪個(gè)速度對(duì)保留活性更好?不言而喻!

 

 

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