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胎牛血清中的外泌體參與細胞的增殖

更新時間:2021-01-26  |  點擊率:798

外泌體(Exosome)是近年研究的熱點,它是新發(fā)現(xiàn)的一種細胞通訊的形式。外形上看,它是30-150nm的小囊泡,里面卻攜帶著多種蛋白質(zhì)、RNA和脂類等重要信息。

 

它由活細胞分泌,進入到血清、唾液、尿液、羊水等多種生物體液中,進而影響鄰近或遠處的細胞。

胎牛血清中的外泌體參與細胞的增殖

 

圖. 外泌體作為一種小囊泡,參與細胞間的通訊。

圖片來自:Graça Raposo.Extracellular vesicles: Exosomes, microvesicles, and friends.J Cell Biol. 2013 Feb 18; 200(4): 373–383

 

胎牛血清是常用的細胞培養(yǎng)基添加成分,它富含多種營養(yǎng),滿足細胞粘附、生長、增殖、解毒等需求。胎牛血清中也含有外泌體,并可能對所培養(yǎng)細胞具有一定作用。

2020年,有文獻報道了胎牛血清外泌體對成骨細胞的增殖起促進作用,則確證了血清中的外泌體確實在細胞培養(yǎng)中發(fā)揮一定的作用。(文獻1)

該實驗的研究設計如下:

一、外泌體的提取和確證

取15 mL胎牛血清,通過超速離心100000xg獲得外泌體,0.22μm過濾清洗后,將外泌體溶于100μlPBS中。并進行透射電子顯微鏡觀察,以及后期WB檢測標志蛋白確證。

二、細胞培養(yǎng)

小鼠胚胎成骨前體細胞MC3T3-E1細胞,前期用含10%胎牛血清的α-MEM培養(yǎng)液培養(yǎng),傳代。選取狀態(tài)良好的第3代細胞用于后續(xù)實驗。

三、細胞分組培養(yǎng)

對照組:胎牛血清(不含外泌體)+ α-MEM

外泌體組:在以上基礎(chǔ)上另加入10 mg/L胎牛血清外泌體。

四、細胞檢測

用CCK-8檢測細胞增殖,WB檢測細胞骨形態(tài)發(fā)生蛋白2、骨橋蛋白。

結(jié)果顯示,24h后,外泌體組細胞增殖明顯高于對照組。同時,促進成骨的蛋白因子,如骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和骨橋蛋白的表達水平明顯增高。

作者指出:胎牛血清外泌體對成骨細胞的增殖起到促進作用,可為臨床治療骨破壞提供新思路。同時,國外的研究表明,使用祛除外泌體的胎牛血清培養(yǎng)細胞,大多數(shù)細胞的生長速率均降低,提示血清中的外泌體在細胞生長及存活方面起到一定的作用(文獻2)。

 

明星產(chǎn)品:Ausbian®特級胎牛血清

Ausbian®特級胎牛血清被各大科研院所、高校重點實驗室及藥廠廣泛使用,多年來持續(xù)穩(wěn)定供應細胞典藏等重大項目。

 

產(chǎn)品描述:

1. 內(nèi)毒素含量極低(≤3EU/ml)(規(guī)定:特級胎牛血清<10EU/ml)。

2. 極利于細胞的生長與傳代,適合各類細胞培養(yǎng)。

3. 每個批號血清均具有完整的檢驗報告。

4. 七次無菌過濾,后三次為0.1μm無菌過濾處理。

5. 進行細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,符合動物協(xié)會要求。

6. 每批次產(chǎn)量為1500瓶-2500瓶,保證大多數(shù)項目兩年不需換批次,細胞試驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定。

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