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比較常見的細胞培養(yǎng)的三種方式

更新時間:2022-03-07  |  點擊率:5107

胞培養(yǎng)是指從體內組織取出細胞膜,模擬體內生存環(huán)境,在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養(yǎng)條件下,使其生長繁殖并維持結構和功能的一種培養(yǎng)技術。目前細胞培養(yǎng)方式主要包括以下三種:

6.1 貼壁培養(yǎng)

貼壁培養(yǎng)主要適用于貼壁依賴性細胞。此類需要相互依賴,需貼附于不起化學作用的物質(玻璃或塑料等無活性物質)的表面生長、生存和維持,并最終在附著面生長至單層,鋪滿平面時便會發(fā)生接觸抑制。大多數動物細胞,包括非淋巴組織的細胞和許多異倍體體系的細胞屬于這一類型,他們需要附著于適量正電荷的固體或半固體的表面勝仗。

6.2 懸浮培養(yǎng)

來源于血液、淋巴組織的細胞,及許多腫瘤細胞(包括雜交瘤細胞)和某些轉化細胞等屬于懸浮培養(yǎng)型細胞,細胞為非貼壁依賴性細胞,無需支撐面,細胞或細胞聚集體懸浮于液體培養(yǎng)基中增殖。懸浮培養(yǎng)是大規(guī)模細胞培養(yǎng)的理想方式,可采用類似于微生物的方法進行懸浮培養(yǎng)。

6.3 固定化培養(yǎng)

動物細胞較微生物脆弱,易受剪切力等的影響,而細胞固定化技術可較好的保護細胞免受機械力及環(huán)境變化的影響,提高細胞的耐受力,促使細胞高密度培養(yǎng),提高目的產物的產率。在傳統的固定化酶技術中,常采用戊二醛、聚丙烯酰胺、聚氨酯等作為固定化細胞載體。但在動物細胞培養(yǎng)中,一般使用較溫和的固定方法,如吸附、包埋、中空纖維或膠囊化等,具有剪切力低、傳遞效果好和抗污染能力強、細胞生長密度高、產物易于收集和分離純化等特點。

由于所培養(yǎng)的細胞的不同,固定化培養(yǎng)的方式也有不同,一般對于貼壁依賴性細胞通常采用膠原包埋,而對于非貼壁依賴性細胞則常用海藻酸鈣包埋。常用的細胞固定化的方法主要有吸附、共價貼附、離子/共價交聯、包埋和微囊化等。

科研實驗中,細胞的體外培養(yǎng)一直是一個重要環(huán)節(jié)。細胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級胎牛血清,它適合各種細胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細胞,如:干細胞、肝細胞,神經細胞,原代培養(yǎng)、細胞融合、轉染細胞等。

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