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破解細(xì)胞生長慢,這幾個關(guān)鍵點你注意了嗎?(上)

更新時間:2022-08-05  |  點擊率:755

在進(jìn)行細(xì)胞實驗的過程中,相信大家都有這樣的經(jīng)歷:實驗規(guī)劃恨不得精細(xì)到每小時,甚至連哪天出數(shù)據(jù)都預(yù)估好了。

But......

理想很豐滿,現(xiàn)實往往很骨感!

“隔壁王師兄的細(xì)胞都能傳代了,我的這細(xì)胞,咋長得這么慢呢?"


所以今天,我們就來聊聊,細(xì)胞生長緩慢(異常情況的慢,一些特殊細(xì)胞不在討論范圍內(nèi))的可能原因。


原因很復(fù)雜,可以總結(jié)為以下幾點,如果小伙伴們有更多觀點,歡迎補充


細(xì)胞可能存在污染


各類細(xì)胞污染

都有可能導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢


如果培養(yǎng)體系,不小心被細(xì)菌、真菌、支原體污染,都會導(dǎo)致細(xì)胞因缺乏營養(yǎng)而出現(xiàn)生長緩慢的現(xiàn)象。


細(xì)菌污染發(fā)展迅速,一般會出現(xiàn)培養(yǎng)基渾濁、變黃的現(xiàn)象;真菌污染最好辨認(rèn),顯微鏡下可見絲狀菌體(有些甚至嚴(yán)重到肉眼可見);而支原體污染往往防不勝防,顯微鏡下也很難捕捉到它的身影。支原體污染的典型特征是培養(yǎng)基提前變黃、細(xì)胞生長受阻,后期細(xì)胞大量死亡等。


因此,如果細(xì)胞生長緩慢,首先要考慮細(xì)胞是否存在污染。并做相應(yīng)的處理。具體處理方法見以下幾篇文章:

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——細(xì)菌

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——真菌

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——支原體


培養(yǎng)體系有瑕疵


沒有根據(jù)細(xì)胞特性調(diào)整培養(yǎng)體系

細(xì)胞的體外培養(yǎng),依賴于*培養(yǎng)基的支持與保護(hù)。有些小伙伴拿到一株陌生的細(xì)胞,沒有將培養(yǎng)體系研究清楚就開始實驗,由于培養(yǎng)環(huán)境的改變,導(dǎo)致細(xì)胞一時無法適應(yīng),而出現(xiàn)生長受阻甚至停滯的狀態(tài)。


當(dāng)我們排除了細(xì)胞污染的情況后,就要考慮培養(yǎng)體系是否合理了:培養(yǎng)基種類、品牌是否進(jìn)行過更換?血清類型是否用錯等等,盡可能保證與原培養(yǎng)條件一致,如果要更換,也要循序漸進(jìn)。


細(xì)胞初始狀態(tài)較差


細(xì)胞長得慢

很可能不是你的鍋

可能最一開始復(fù)蘇的細(xì)胞,就被污染/活力不足。因此,建議大家再復(fù)蘇一管同種細(xì)胞(最好不是同批次凍存的),與現(xiàn)有細(xì)胞進(jìn)行比較,觀察長勢。


本期內(nèi)容先暫停到這里,欲知其他原因,且聽下回分解!


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