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血清為什么滅活菌

更新時間:2022-10-15  |  點擊率:844

何為熱滅活?

經(jīng)常使用血清作為添加劑來培養(yǎng)細(xì)胞的小伙伴,對熱滅活應(yīng)該都不陌生。

一般情況下,血清的滅活是指解凍后的血清,通過水浴加熱的方式,將其加熱至56℃維持30分鐘,或者40℃維持20分鐘,以達(dá)到滅活補體的目的。

補體是什么?

既然熱滅活的主要針對補體,那么我們就要搞清楚補體的是什么?有哪些基本的功能?

什么是補體?

補體是廣泛存在于人和脊椎動物體血清及組織液中,不耐熱,活化后具有酶活性、可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)的一類蛋白質(zhì)。

補體的基本功能

補體系統(tǒng)可通過3條既相對獨立又相互聯(lián)系的途徑被激活,從而發(fā)揮生理作用。

包括但不限于調(diào)理吞噬、裂解細(xì)胞、介導(dǎo)炎癥、免疫調(diào)節(jié)和清除免疫復(fù)合物等多種生物學(xué)效應(yīng),包括增強(qiáng)吞噬作用,增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的趨化性;增加血管的通透性;中和病毒;細(xì)胞溶解作用;免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用;刺激平滑肌收縮、細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。

血清是否均需要熱滅活?

血清的最佳工作溫度一般是在37℃左右,所以熱滅火對于血清而言,也是一種不小的傷害,會導(dǎo)致一些營養(yǎng)成分流失,進(jìn)而影響細(xì)胞狀態(tài)。

但如果所用血清中含有補體,且所培養(yǎng)的細(xì)胞、所涉及的實驗對補體相關(guān)的蛋白較為敏感,建議進(jìn)行熱滅活處理。

胎牛血清

正規(guī)的胎牛血清,要求對5-8月胎齡(一般牛在10個月左右足月,后自然分娩)的胎牛采用心臟穿刺的方法采血,隨后進(jìn)行其他制備步驟,得到胎牛血清。

因此:

靠譜的胎牛血清,沒有形成一個完整的補體系統(tǒng),不會真正地干預(yù)免疫!

非胎牛血清

新生牛血清、小牛血清、成牛血清、馬血清、豬血清這類動物血清,一般采集自補體系統(tǒng)發(fā)育*的供體,因此,如果涉及以下幾個方向(包括但不限于)建議合理熱滅活。

1、免疫學(xué)研究

2、誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化

3、利用昆蟲細(xì)胞研究病毒感染

4、培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞

5、其他補體參與的細(xì)胞培養(yǎng)過程


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