CHINESE老熟妇老女人HD,色欲蜜桃AV无码中文字幕,成人免费ā片在线观看,japan高清日本乱xxxxx

當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  細(xì)胞凍存『掃雷指南』,這些關(guān)鍵點(diǎn)必看!

細(xì)胞凍存『掃雷指南』,這些關(guān)鍵點(diǎn)必看!

更新時(shí)間:2022-12-26  |  點(diǎn)擊率:768

細(xì)胞凍存

細(xì)胞凍存是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)常規(guī)步驟,是細(xì)胞保存的重要方法之一。將細(xì)胞低溫保存在-196℃液氮中,使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而進(jìn)入休眠階段,以便日后復(fù)蘇重新培養(yǎng)擴(kuò)增。

細(xì)胞凍存方法

細(xì)胞凍存實(shí)驗(yàn),在往期文章中也有提到

保姆級(jí)細(xì)胞凍存方法

看似簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),仍有一些關(guān)鍵點(diǎn)需要格外留意,切莫踩到“雷區(qū)",造成“實(shí)驗(yàn)大翻車(chē)"。

凍存操作前:

選擇長(zhǎng)勢(shì)良好、存活率高,且生長(zhǎng)密度在80%—90%的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行雜質(zhì)檢測(cè):是否有雜細(xì)胞或者支原體等雜質(zhì)。

這里推薦使用MB支原體常規(guī)法PCR檢測(cè)試劑盒,非定量檢測(cè),常規(guī)PCR即可滿(mǎn)足需求,方便快捷,靈敏度高。

所用凍存試劑DMSO應(yīng)為分析級(jí),避光儲(chǔ)存。

凍存前一日,對(duì)需保存的細(xì)胞進(jìn)行換液處理。

凍存操作

配制凍存培養(yǎng)基(常規(guī)含量):DMSO含量5-10%,血清含量20%左右。

用凍存培養(yǎng)基將離心后的細(xì)胞進(jìn)行重懸。

分裝至無(wú)菌凍存管中。

梯度降溫:

4℃ 10 分鐘

?

-20℃ 30 分鐘

?

-80℃ 16~18 小時(shí)

?

液氮

或?qū)⒀b有細(xì)胞的凍存管,置于程序降溫盒中,放入-80℃冰箱中,一天后轉(zhuǎn)移至液氮中。

液氮的液相儲(chǔ)存與氣相儲(chǔ)存

一般認(rèn)為:-196℃的液氮,對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的細(xì)胞而言,是一比較合適的環(huán)境。因此,我們會(huì)將裝有細(xì)胞的凍存管,放入專(zhuān)用的方形凍存盒中,再裝進(jìn)液氮罐配套的提籃提籃中,浸入液氮的液相中進(jìn)行保存。

但在液相中長(zhǎng)期儲(chǔ)存,容易面臨以下問(wèn)題:

如果凍存管在罐內(nèi)密封不嚴(yán),則會(huì)引起液氮滲入管內(nèi),灌滿(mǎn)整個(gè)樣品管,造成樣品的污染。不僅如此,在取出凍存管的時(shí)候,液氮沸騰氣化使管內(nèi)氣壓升高,發(fā)生炸裂,容易傷到實(shí)驗(yàn)人員。

因此,有人提出,可以將細(xì)胞置于液氮的氣相中進(jìn)行儲(chǔ)存。

液氮罐內(nèi)溫度較比液相儲(chǔ)存高,一般在-135℃至-190℃,對(duì)于細(xì)胞儲(chǔ)存而言,該溫度也符合要求,但在實(shí)際操作過(guò)程中,也存在一定弊端:

與液相液氮罐相比,氣相液氮罐,在相同體積的液氮中保存時(shí)間更短,需對(duì)液氮罐內(nèi)的溫度進(jìn)行監(jiān)控,及時(shí)補(bǔ)充液氮來(lái)維持罐內(nèi)溫度。

所以,應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)環(huán)境、實(shí)驗(yàn)條件等情況,合理選擇液相儲(chǔ)存或是氣相儲(chǔ)存。在正確操作的前提下,這兩者都能達(dá)到比較好的凍存效果


男人日女人| 少妇搡BBBB搡| 美女露?0的奶头无挡挡| 沉沦同学胯下的美妇| 老熟女草bx×| 任我爽橹在线视频精欧美| 精品久久久久久中文字幕无码 | 汤芳人体摄影| 人妻换人妻仑乱| 国产色婷婷免费视频在线69堂| 亚洲综合一区二区三区无码| 人妻无码中文专区久久五月婷| 国产曰的好深好爽免费视频| おっさんとわたし天堂的资源| 国产vpswindows精品| 亚洲av成人无码久久精品老人| 少妇被大肉楱征服小说| 亚洲av永久无码嘿嘿嘿| 欧美国产高清欧美内衣办| 国产产无码乱码精品久久鸭| 美女黄网站成人免费视频| av无码免费岛国动作片| 惩罚她给她用最粗的玉势h| 国产手机精品一区| 国产精品点击进入在线影院高清| 国产又色又爽无遮挡免费| 在免费jizzjizz在线播放| 欧美老妇大p毛茸茸| 精产国品一二三产品区别在| jrs直播(无插件)直播| 无码人妻精品一区二区三区夜夜嗨| 我变成黑皮辣妹和朋友做了 | 粗了大了 整进去好爽视频| 天堂www中文在线资源| 欧美性受xxxx| 装睡被陌生人摸出水好爽| 强奷漂亮少妇高潮a片xxxx| 老妇性hqmaturetube| 亚洲精品尤物av在线观看任我爽 | freezeframe丰满寡妇| 色欲AⅤ亚洲情无码AV|