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原代細胞體外培養(yǎng),揭示病毒如何進出鼻腔

更新時間:2023-02-17  |  點擊率:553

 SARS-CoV-2導致了疾病大流行。

病毒刺突糖蛋白(SP)與宿主受體結合后,血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2 (ACE2)和宿主跨膜絲氨酸蛋白酶2 (TMPRSS2)啟動SP促進病毒融合,病毒進入宿主細胞并開始復制。病毒復制已在組織培養(yǎng)中建模。然而,SARS-Cov-2復制的主要部位是上呼吸道,這是專門為病毒感染創(chuàng)造屏障的。事實上,病毒細胞進入、退出以及在氣道上皮細胞間傳播的機制尚不清楚。

近日,發(fā)表在《Cell》上,標題為:“Cell-cell metabolite exchange creates a pro-survival metabolic environment that extends lifespan"的文章中,報告了一項新研究。

研究人員利用原代鼻上皮類器官培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)病毒通過ACE2受體附著在活動纖毛上。SARS-CoV-2穿過黏液層,利用活動纖毛作為通道進入細胞體。纖毛減少可以阻止SARS-CoV-2和其他呼吸道病毒的感染。SARS-CoV-2子代在感染24小時后附著在氣道微絨毛上,并引發(fā)頂端延伸和高度分枝的微絨毛的形成,這些微絨毛組織病毒從微絨毛出口回到黏液層,支持病毒通過粘液纖毛運輸在氣道組織中擴散的模型。

磷酸化蛋白組學和激酶抑制研究表明,微絨毛重塑是由p21活化激酶(PAK)調(diào)控的。重要的是,Omicron變體與運動纖毛具有更高的親和力,并顯示出加速病毒進入。

研究表明,活動纖毛、微絨毛和黏液纖毛依賴的黏液流動對于病毒在鼻上皮細胞中的高效復制至關重要。

本實驗中,利用了原代細胞的體外培養(yǎng)。原代細胞體外培養(yǎng)難度大,易污染。需要高品質(zhì)的胎牛血清,對體外培養(yǎng)的細胞進行滋養(yǎng)。Ausbian進口特級胎牛血清,品質(zhì)優(yōu)異,實驗數(shù)據(jù)表現(xiàn)良好,為細胞實驗保駕護航。


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