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貼壁細(xì)胞支原體污染:識(shí)別、處理與預(yù)防

更新時(shí)間:2024-03-23  |  點(diǎn)擊率:481

貼壁細(xì)胞作為生物醫(yī)學(xué)研究中常用的一種細(xì)胞類(lèi)型,在實(shí)驗(yàn)室中扮演著重要的角色。然而,支原體污染可能會(huì)對(duì)貼壁細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和健康產(chǎn)生嚴(yán)重影響。本文將介紹如何判斷貼壁細(xì)胞是否被支原體污染、污染后的處理方法以及預(yù)防措施。

 

判斷貼壁細(xì)胞是否被支原體污染

1. 細(xì)胞形態(tài)觀察

一般情況下,支原體污染的早期,通過(guò)顯微鏡難以觀察到貼壁細(xì)胞有明顯變化。支原體污染的中后期,可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)異常,如形態(tài)不規(guī)則、大小不一、培養(yǎng)液提前變黃、細(xì)胞大量漂浮、細(xì)胞活力下降等現(xiàn)象。

 

2. PCR檢測(cè)

使用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中是否存在支原體DNA。PCR是一種高度敏感的方法,可用于檢測(cè)微量的支原體。

 

 

處理支原體污染的貼壁細(xì)胞

1. 隔離受污染細(xì)胞

首先,需要將被支原體污染的細(xì)胞與其他無(wú)污染的細(xì)胞進(jìn)行隔離,防止污染的擴(kuò)散。

 

2. 清潔和消毒

清潔受污染的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)器具和工作臺(tái),使用有效的消毒劑,如德國(guó)MB公司的Mycoplasma off支原體清除噴霧劑。

 

3. 處理污染細(xì)胞

如果貼壁細(xì)胞已經(jīng)被污染,需要停止使用這些細(xì)胞并盡早處理。如果是不能隨意丟棄的細(xì)胞,可使用Mynox®珍貴生物樣品支原體清除試劑對(duì)細(xì)胞中的支原體進(jìn)行清除。

 

4. 檢查其他細(xì)胞系

檢查實(shí)驗(yàn)室中其他細(xì)胞系是否也存在支原體污染,以防止污染傳播。

 

預(yù)防貼壁細(xì)胞支原體污染

1. 嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范

在無(wú)菌條件下操作。

定期清潔和消毒實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作區(qū)域。

避免直接接觸可能污染的物品,如培養(yǎng)皿、試劑瓶等。

2. 使用無(wú)菌技術(shù)

使用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的無(wú)菌技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)、傳代和操作。

使用無(wú)菌的培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基。

3. 定期檢測(cè)

定期對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行支原體污染的檢測(cè),及時(shí)發(fā)現(xiàn)并處理。

建立規(guī)范的檢測(cè)流程,包括PCR、免疫染色等方法。

貼壁細(xì)胞的支原體污染可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和研究產(chǎn)生嚴(yán)重影響,因此及時(shí)識(shí)別、處理和預(yù)防支原體污染是至關(guān)重要的。只有確保細(xì)胞的無(wú)菌狀態(tài),才能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,進(jìn)而推動(dòng)科研工作的順利進(jìn)行。

 

通過(guò)以上的方法和注意事項(xiàng),希望可以幫助研究人員更好地管理和保護(hù)貼壁細(xì)胞,確保其在實(shí)驗(yàn)室中的健康和純凈狀態(tài)。


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