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研究雙歧桿菌的利器

更新時(shí)間:2019-05-09  |  點(diǎn)擊率:1503

雙歧桿菌是革蘭氏陽性有分叉的桿菌(Y型,如兩歧雙歧桿菌;也有V型,如嬰兒雙歧桿菌或短桿狀,如長雙歧桿菌)。它越來越得到人類的重視。它作為人類腸道的長期定居菌(在嬰兒中甚至為顯著優(yōu)勢(shì)菌),對(duì)人的生理作用起到不可忽視的影響,例如:它刺激機(jī)體的免疫反應(yīng),形成腸道屏障,阻止致病菌的入侵,合成人體所需的維生素等。雙歧桿菌制劑常用于治療菌群失調(diào)、腹瀉、幽門螺桿菌陽性的消化道潰瘍等疾病。在酸奶中加入雙歧桿菌作為發(fā)酵菌種,其保健效果也大為提高。曾有的微生物學(xué)家指出:“光輝的抗生素之后的時(shí)代,將是活菌制劑的時(shí)代”。

 

鑒于雙歧桿菌的重要價(jià)值,我們常需要將雙歧桿菌同其他乳酸菌區(qū)別開來?,F(xiàn)有的《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 雙歧桿菌檢驗(yàn)》存在一定的局限,在鑒定方面,這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)只適合食品中僅含有單一雙歧桿菌菌種的鑒定。在計(jì)數(shù)方面,它只適合食品中僅含有雙歧桿菌屬的計(jì)數(shù)。而在實(shí)際情況中,常常是多個(gè)菌屬混雜的情況。HiMedia開發(fā)的雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基HiCrome™
Bifidobacterium Agar,可很好地將雙歧桿菌同乳桿菌區(qū)分開來。

 

該培養(yǎng)基除了含有必要的營養(yǎng)外,還含有牛奶蛋白,它有助于檢測(cè)酪蛋白水解反應(yīng)。如有該反應(yīng),則菌落會(huì)有不透明光暈(短雙歧桿菌為該反應(yīng)陽性);同時(shí)含有多種顯色劑,有助于鑒別乳桿菌和雙歧桿菌。乳桿菌菌落在該培養(yǎng)基上表現(xiàn)為綠色菌落和不透明光暈,嬰兒雙歧桿菌表現(xiàn)為深藍(lán)色至藍(lán)綠色菌落,短雙歧桿菌表現(xiàn)為粉紅色菌落,有不透明光暈(見下圖)。

 

 

HiMedia還提供有雙歧桿菌的生化鑒定試劑盒(貨號(hào)KB021),該試劑盒包含了12種生化試驗(yàn),為觸酶試驗(yàn)、阿拉伯糖試驗(yàn)、纖維二糖試驗(yàn)、果糖試驗(yàn)、乳糖試驗(yàn)、麥芽糖試驗(yàn)、甘露糖試驗(yàn)、蜜二糖試驗(yàn)、棉子糖試驗(yàn)、蔗糖試驗(yàn)、木糖試驗(yàn)、水楊苷試驗(yàn)。所調(diào)菌落可接種在5ml雙歧桿菌肉湯(M1395)中,35-37℃厭氧培養(yǎng)6-18小時(shí),直到菌液濁度≥0.1OD(620nm)或0.5麥?zhǔn)蠁挝?。然后無菌打開試劑盒,撕掉封條。在鑒定卡中每孔接種50μl菌液,35℃-37℃厭氧孵育24-48小時(shí)。孵育后,完成觸酶試驗(yàn),在第1孔用接種環(huán)在孔內(nèi)培養(yǎng)基生長表面刮擦取樣,然后蘸到含3%H2O2溶液的干凈試管中。接種環(huán)表面冒泡為陽性反應(yīng)。沒有冒泡為陰性反應(yīng)。然后根據(jù)結(jié)果詮釋表和菌種標(biāo)準(zhǔn)表,完成菌種鑒定。該試劑盒一共可鑒定35種雙歧桿菌。

 

HiMedia公司還提供了一款雙歧桿菌選擇性計(jì)數(shù)瓊脂(貨號(hào)M1734),用于發(fā)酵乳和乳酸菌飲品中的雙歧桿菌計(jì)數(shù)。該培養(yǎng)基含有高純度的低聚半乳糖,很好的支持雙歧桿菌生長;同時(shí)含有鹽酸半胱氨酸,創(chuàng)造出雙歧生長所需的還原條件;而培養(yǎng)基中的莫匹羅星則抑制大多數(shù)的乳業(yè)所用的乳酸菌生長。用標(biāo)準(zhǔn)菌株證實(shí),接種的50-100CFU雙歧桿菌能在該培養(yǎng)基中旺盛生長。

 

雙歧桿菌的鑒定有助于選育優(yōu)良的雙歧桿菌菌株,開發(fā)雙歧桿菌發(fā)酵飲品或制劑。在這方面,HiMedia的雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基、生化鑒定試劑盒以及還可提供的雙歧桿菌選擇性計(jì)數(shù)瓊脂,無疑為研究人員和質(zhì)檢人員對(duì)雙歧桿菌的分離、鑒定和計(jì)數(shù)提供了極大的便利。

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